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二倍浓度革兰氏阴性(GN)增菌液

二倍浓度革兰氏阴性(GN)增菌液

更新时间:2020-09-28

厂商性质:生产厂家

生产地址:重庆市

产品报价:

产品特点:胰蛋白胨提供碳源、氮源、维生素和矿物质;葡萄糖和甘露醇提供糖类;枸缘酸钠和去氧胆酸钠抑制革兰氏阳性细菌,但不影响沙门氏菌和志贺氏菌的生长;磷酸二氢钾和磷酸氢二钾是缓冲剂;氯化钠维持均衡的渗透压。
二倍浓度革兰氏阴性(GN)增菌液用于污水、污泥中志贺氏菌的检测;

详细资料

【预期用途】

二倍浓度革兰氏阴性(GN)增菌液用于污水、污泥中志贺氏菌的检测;

【检验原理】

胰蛋白胨提供碳源、氮源、维生素和矿物质;葡萄糖和甘露醇提供糖类;枸缘酸钠和去氧胆酸钠抑制革兰氏阳性细菌,但不影响沙门氏菌和志贺氏菌的生长;磷酸二氢钾和磷酸氢二钾是缓冲剂;氯化钠维持均衡的渗透压。

【储存条件及有效期】

避光、10~30,有效期限为12个月,具体详见产品包装上所示。

【样本要求】

污水200mL1:10的污泥混悬液100mL经无菌滤膜过滤后的截留物。 

【检验方法】

  1. 样品处理和增菌
  1. 污水

    200mL 污水,用灭菌滤膜进行抽滤。用100mL 二倍浓度革兰氏阴性(GN)增菌液把滤膜上截留的杂质洗脱到已灭菌的三角烧瓶内,摇匀,置于37恒温培养箱,增菌培养68h

注:若样品为经过氯消毒的污水,应在采样后立即用5%硫代硫酸钠溶液充分中和余氯。

  1. 污泥

取污泥30g,放入灭菌容器内,加入300mL 灭菌水,充分混匀制成110 混悬液。吸取上述110 混悬液100mL,加入到装有100mL 二倍浓度GN增菌液的已灭菌的三角烧瓶内,搅匀,置于37恒温培养箱中,增菌培养68h

注:若样品为经过氯消毒的污泥,应在采样后立即用5%硫代硫酸钠溶液充分中和余氯。

  1. 平板分离

2.1  取上述增菌培养液,分别接种SS 培养基平板和EMB 培养基平板,置于37培养箱中培养24h

2.2  挑取在SS培养基平板EMB培养基平板上呈无色透明,直径11.5mL 的可疑肠道病原菌菌落。每个平板最少挑取5个菌落,接种于TSI 培养基和动力管(半固体琼脂培养基)中,置于37培养箱中培养1824h

2.3  结果描述:在TSI 中,葡萄糖产酸不产气,不产生硫化氢,上层斜面乳糖不分解,在动力管中有无动力的菌株,需做血清学试验和生化试验。

  1. 鉴定
  1. 血清学试验

志贺氏菌属分为四个群,先与多价血清作玻璃片凝集试验,如为阳性,再分别与ABCD 群血清凝集,并进一步与分型血清做玻璃片凝集,最后确定其血清型。

  1. 生化试验

应进行葡萄糖、甘露醇、麦芽糖、乳糖、蔗糖、靛基质、硫化氢、动力、尿素试验。志贺氏菌属能分解葡萄糖,但不产气(福氏志贺氏菌6 型有时产生少量气体),一般不能分解乳糖和蔗糖,宋内氏志贺氏菌对乳糖和蔗糖迟缓发酵产酸。志贺氏菌属均不产生硫化氢,不分解尿素,无动力。对甘露醇、麦芽糖的发酵及靛基质的产生,则因菌株不同而异。

如遇多价血清玻璃片凝集试验为阴性,而生化反应符合上述情况时,可加做肌醇、水杨酸、V-P、橼酸盐等试验。志贺氏菌属均为阴性反应。

  1. 检验结果报告

根据检验结果,报告一定体积的样品中存在或不存在志贺氏菌。

 

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