营养琼脂培养基

【预期用途】
营养琼脂培养基用于分离培养出常见的易于生长的一般细菌
【检验原理】
营养琼脂培养基为细菌提供了较丰富的营养物质基础，供非苛养的需氧菌、兼性厌氧菌的生长。
【样本要求】
各种适用样本；待检测的物表、器械表面、包装表面和手、空气等。
【检验方法】
1. 试验应严格遵守无菌操作，防止微生物污染；
2. 一般标本接种：
1) 按微生物学检验要求，将标本适量接种于营养琼脂培养基里进行培养，在需氧；
35℃±2℃的条件下、孵育18h～48h；
2) 培养基生长出菌落后，进行染色或转种处理。
3. 未经消毒剂消毒的物体、用品表面采样及检测（乙醇消毒的可直接使用）
1) 采样方法和孵育
─ 使用营养琼脂培养基（φ55 mm），打开平皿盖，将琼脂平板反扣放置在物体表面，勿
再移动，轻压10s（23.76cm2）为确保琼脂与物表充分接触，应将琼脂与物表之间的气
体挤压出去以充分接触，然后小心盖上平皿盖，送往实验室，放置孵箱进行培养。送
检时间不超过6h；
注：采样时，采样平板的区域不要重叠。
─ 需氧，35℃±2℃孵育72h。
2) 物体采样面积要求：被采面积＜100cm2，取表面全部，平板所用个数应符合不重叠的要
求；被采样表面≥100cm2取100cm2。采样100cm2需要5个琼脂接触平板，或者说采样用
了5个琼脂接触平板，则采样面积为23.76×5=118.80cm2；
3) 计数菌落数和计算：
─ 借助放大镜计数每个平板上的菌落，并合计；
─ 结果=平板菌落计数总数/平板数*23.76cm2。
4) 判断标准，请用户参考现行的相关法规文件和标准。
4. 空气采样
1) 采样方法和孵育
─ 将营养琼脂培养基（φ90 mm）按采样点布置图逐个放置，然后从里到外逐个打开培养
皿盖，使培养基表面暴露在空气中；
─ 静态测试时，平板暴露时间为30min以上；动态测试时，平板暴露时间为不大于4h；
─ 全部采样结束后，将平板倒置于恒温培养箱中培养：需氧，35℃±2℃孵育72h。
2) 计数菌落数和计算：
─ 借助放大镜计数每个平板上的菌落，并合计；
─ 结果=平板菌落计数总数/平板数。
3) 判断标准，请用户参考现行的相关法规文件和标准。
5. 倾注法
1) 方法和孵育
─ 将营养琼脂培养基（试管）水浴溶化，恒温至48~50℃；
─ 取适量标本液用无菌手法接种在无菌空培养皿中，再将恒温的营养琼脂培养基倾注在
培养皿中，摇匀；
─ 待琼脂凝固后，将平板倒置于恒温培养箱中培养：需氧，35℃±2℃孵育72h。
2) 计数菌落数和计算：
─ 借助放大镜计数每个平板上的菌落，并合计；
─ 结果=平板菌落计数总数/平板数。
3) 判断标准，请用户参考现行的相关法规文件和标准。