服务热线
86-023-88613755
【预期用途】
改良真菌药敏培养基用于真菌的纸片扩散法药物敏感实验。
【检验原理】
在改良真菌药敏培养基表面涂抹接种上细菌,然后贴上一定含量抗真菌药物的纸片,再在特定条件下经过孵育。由于纸片中所含抗真菌药物对细菌不同程度,不同圆形纸片周围会出现直径大小不同的圆形的无菌生长区域——称为“抑菌圈”。量取抑菌圈直径(㎜),对照实验室所参照的判读标准,得出被测细菌对被测抗真菌药物的药物敏感试验结果是“敏感”、“中介”还是“耐药”。
【样本要求】
分离纯化的真菌菌株,选自念珠菌显色培养基上或非选择性马铃薯葡萄糖培养基上孵育 20~24 h 的纯化菌株,菌落特征典型。
【检验方法】
1. 试验应严格遵守无菌操作, 防止微生物污染;
2. 接种物制备——直接菌落悬液法
1) 从孵育 20~24 h 的琼脂平板(应选用念珠菌显色培养基上或非选择性马铃薯葡萄糖培养
基)上挑取数个单个菌落,直接在 3 mL 的生理盐水中制成菌悬液;
2) 调整菌悬液的浊度使其相当于 0.5 麦氏浓度[(1~2)×10 8 CFU/mL]。肉眼观察,应在足
够的光线下,贴靠着有黑白相间粗线条的比色卡与 0.5 麦氏浓度标准管进行比较。
3. 接种平板
1) 平板的准备:35±2℃孵箱,平板正放,皿盖半开,放置约 20~30 min,使其恢复至室温
并使琼脂表面冷凝水干掉;
2) 调整好菌悬液的浊度后,在 15 min 内将无菌棉签浸入菌悬液内。紧贴试管内壁在液体上
方旋转拭子数次,除去棉签上多余的液体;
3) 用拭子横划线接种整个表面干燥的琼脂表面;然后再旋转平板约 60º,再次用拭子横划线
接种;如此两次,亦即从 3 个方向(60º)用棉签划线接种琼脂表面,以确保每次接种均
匀分布,最后在琼脂平板的边缘涂抹一圈;
4) 盖子可半开 3~5 min,以使琼脂吸收表面多余的水分,在 15 min 内贴完药敏试验纸片。
4. 纸片在已接种的琼脂平板上的位置
1) 将预先设定的一组抗菌药物纸片分置在已接种细菌的琼脂表面,每个纸片必须压下以确保
与琼脂表面完全接触,无论是单独放置的纸片或有纸片分配设备,纸片必须分布均匀,两
纸片之间圆心的距离不少于 24 ㎜。90 ㎜的平板放置不超过 4 个纸片。但对于一些药物产
生的抑菌环很大,在一个琼脂板内仅放置 2~3 个纸片。注意纸片距离琼脂边缘的距离同
样重要,无论有多少纸片,如果纸片放置得太靠近琼脂的边缘(≥10 ㎜),一些药物的
抑菌环可能会不完整,由于一些药物几乎是瞬间扩散的,一旦纸片与琼脂表面接触,就不
能再移动,如位置不佳可在琼脂的另一个位置重新放置一个纸片;
2) 在放置好纸片后 15 min 内倒置琼脂板并将它放置在 35±2℃的孵箱中,需氧孵育 20~24 h。
如果你对MHGMB改良真菌药敏培养基感兴趣,想了解更详细的产品信息,填写下表直接与厂家联系: |