药敏纸片

药敏纸片

更新时间:2020-09-28

厂商性质:生产厂家

生产地址:重庆市

产品报价:

产品特点:药敏纸片涂抹接种上细菌,然后贴上一定含量抗微生物药物的纸片,再在特定条件下经过孵育。由于纸片中所含抗微生物药物对细菌不同程度,不同圆形纸片周围会出现直径大小不同的圆形的无菌生长区域——称为“抑菌圈"。量取抑菌圈直径(㎜),对照实验室所参照的判读标准,得出被测细菌对被测抗微生物药物的药物敏感试验结果是“敏感"、“中介"还是“耐药"。适用于非苛养菌的纸片扩散法药物敏感试验。

详细资料

药敏纸片

【预期用途】
适用于非苛养菌的纸片扩散法药物敏感试验。
【检验原理】
在琼脂培养基表面涂抹接种上细菌,然后贴上一定含量抗微生物药物的纸片,再在特定条件下
经过孵育。由于纸片中所含抗微生物药物对细菌不同程度,不同圆形纸片周围会出现直径大小不同
的圆形的无菌生长区域——称为“抑菌圈”。量取抑菌圈直径(㎜),对照实验室所参照的判读标准,得出被测细菌对被测抗微生物药物的药物敏感试验结果是“敏感”、“中介”还是“耐药”。
【样本要求】
来自非选择性培养基(如血琼脂)孵育18h~24h的纯化的菌株,菌落特征典型。
 

药敏纸片

【检验方法】
1. 试验应严格遵守无菌操作, 防止微生物污染;
2. 接种物制备——直接菌落悬液法
1) 从孵育18h~24h的琼脂平板(应选用非选择性培养基如血琼脂)上挑取数个单个菌落,
直接在3ml的生理盐水中制成菌悬液;
2) 调整悬液的浊度使其相当于0.5麦氏浓度[(1~2)×108CFU/mL]。肉眼观察,应在足够的
光线下贴靠着有黑白相间粗线条的比色卡与0.5麦氏浓度标准管进行比较。
3. 接种平板
1) M-H药敏试验琼脂平板的准备:35℃±2℃孵箱,平板正放,皿盖半开,放置约20min~
30min,使其恢复至室温并使琼脂表面冷凝水干掉;
2) 调整好悬液的浊度后在15min内将无菌棉签浸入悬液内。紧贴试管内壁在液体上方旋
转拭子数次,除去棉签上多余的液体;
3) 用拭子横划线接种整个表面干燥的琼脂表面;然后再旋转平板约60º,再次用拭子横划线
接种;如此两次,亦即从3个方向(60º)用棉签划线接种琼脂表面,以确保每次接种均
匀分布,最后在琼脂平板的边缘涂抹一圈;
4) 盖子可半开3min~5min,以使琼脂吸收表面多余的水分,在15min内贴完药敏试验纸片。
4. 纸片在已接种的琼脂平板上的位置
1) 将预先设定的一组抗菌药物纸片分置在已接种细菌的琼脂表面,每个纸片必须压下以确
保与琼脂表面完全接触,无论是单独放置的纸片或有纸片分配设备,纸片必须分布均匀,
两纸片之间圆心的距离不少于24㎜。90㎜的平板放置不超过5个纸片。在预期的产生小的抑菌环的纸片(例如:庆大霉素或万古霉素)旁边放置产生大的抑菌环的纸片(如头孢菌素类)以避免重叠区。注意纸片距离琼脂边缘的距离同样重要,无论有多少纸片,如果纸片放置得太靠近琼脂的边缘(≥10㎜),一些药物的抑菌环可能会不完整,由于一些药物几乎是瞬间扩散的,一旦纸片与琼脂表面接触,就不能再移动,如位置不佳可在琼脂的另一个位置重新放置一个纸片;
2) 在放置好纸片后15min内倒置琼脂板并将它放置在(35℃±2℃)的孵箱中。
5. 平板的判断
1) 经过16h~18h的孵育后,检查每个平板。如果平板的涂布令人满意,接种正确,由此产
生的抑制圈是均匀的圆形,并会有融合生长的菌苔。如果可见单个菌落,说明接种量过
稀,必须重复试验。测量完全抑制区的直径(由肉眼来判断),包括纸片的直径。测量
抑菌环至接近的整毫米数,采用游标卡尺或尺子在培养板的背面测量。将培养板放在
一个黑色不反光的背景上并用反射的光照射,但下列情况除外:
a. 如果测试苯唑西林、头孢西丁、甲氧西林或奈夫西林对葡萄球菌的敏感性,孵育时间必
须达到24h,才能提交敏感性的报告;其他的药物可以在孵育16h~18h 后读取结果并报
告。用透射光(平板举向光源)来检查苯唑西林在明显抑菌环内有无耐药菌落的少量生
长。抑制圈内任何区域出现可辨别的生长都判为苯唑西林耐药;
b. 如果检测万古霉素对金黄色葡萄球菌或肠球菌属的敏感性, 孵育时间必须达到24h,才能
报告其敏感性。其它药物可以孵育16h~18h 后读取结果并报告。对万古霉素检测的纸片
扩散法不推荐用于凝固酶阴性的葡萄球菌。
2) 没有肉眼可见的明显的生长区即可认为抑制圈边缘。 在抑菌环边缘的只能在放大镜下观
察到的微小菌落的生长可以忽略不计。
a. 含甲氧苄啶和磺胺类药物测试中,培养基中含有的某些拮抗剂可能会导致轻微的生长;
因此,忽略少量生长(20%或更少的边缘生长),并测量比较明显的边缘,以确定抑菌
环的直径。

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