营养肉汤琼脂培养基

【检验方法】

1. 试验应严格遵守无菌操作，防止微生物污染；
2. 一般标本接种：

1. 按微生物学检验要求，将标本适量接种于营养琼脂培养基里进行培养，在需氧；35℃±2℃的条件下、孵育18h～48h；
2. 培养基生长出菌落后，进行染色或转种处理。

1. 未经消毒剂消毒的物体、用品表面采样及检测（乙醇消毒的可直接使用）

1. 采样方法和孵育

• 使用营养琼脂培养基（φ55 mm），打开平皿盖，将琼脂平板反扣放置在物体表面，勿再移动，轻压10s（23.76cm²）为确保琼脂与物表充分接触，应将琼脂与物表之

• 间的气体挤压出去以充分接触，然后小心盖上平皿盖，送往实验室，放置孵箱进行培养。送检时间不超过6h；

注：采样时，采样平板的区域不要重叠。

• 需氧，35℃±2℃孵育72h。

1. 物体采样面积要求：被采面积＜100cm²，取表面全部，平板所用个数因符合不重叠的要求；被采样表面≥100cm²取100cm²。采样100cm²需要5个琼脂接触平板，或者说采样用了5个琼脂接触平板，则采样面积为23.76×5=118.80cm²；
2. 计数菌落数和计算：

• 借助放大镜计数每个平板上的菌落，并合计；
• 结果=平板菌落计数总数/平板数*23.76cm²。

1. 判断标准，请用户参考现行的相关法规文件和标准。

1. 空气采样

1. 采样方法和孵育

• 将营养琼脂培养基（φ90 mm）按采样点布置图逐个放置，然后从里到外逐个打开培养皿盖，使培养基表面暴露在空气中；
• 静态测试时，平板暴露时间为30min以上；动态测试时，平板暴露时间为不大于4h；
• 全部采样结束后，将平板倒置于恒温培养箱中培养：需氧，35℃±2℃孵育72h。

1. 计数菌落数和计算：

• 借助放大镜计数每个平板上的菌落，并合计；
• 结果=平板菌落计数总数/平板数。

1. 判断标准，请用户参考现行的相关法规文件和标准。

1. 倾注法

1. 方法和孵育

• 将营养琼脂培养基（试管或袋/瓶装）水浴溶化，恒温至48~50℃；
• 取适量标本液用无菌手法接种在无菌空培养皿中，再将恒温的营养琼脂培养基倾注在培养皿中，摇匀；
• 待琼脂凝固后，将平板倒置于恒温培养箱中培养：需氧，35℃±2℃孵育72h。

1. 计数菌落数和计算：

• 借助放大镜计数每个平板上的菌落，并合计；
• 结果=平板菌落计数总数/平板数。

1. 判断标准，请用户参考现行的相关法规文件和标准。